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ELISA澳门威尼斯人注册网站竞争抑制方法的建立
浏览次数:834发布日期:2015-02-25

试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上,标记完后取上清用Sephedex G200凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/LpH7.4的PBS,流速为15mELISA澳门威尼斯人注册网站l/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积为横坐标,吸光值为纵坐标做图,ELISA澳门威尼斯人注册网站收集*峰即为酶标抗体峰。
标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值,计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。包被用缓冲液及zui适包被抗原浓度的优化包被缓冲液的优化
包被抗原时,为了得到*的包被效果,大家采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mMph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,ELISA澳门威尼斯人注册网站用自动酶标仪小鼠ELISA澳门威尼斯人注册网站分析,选择*的包被缓冲液系统。同时为了保证缓冲液能够经久保存,在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。

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