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ELISA实验方法之直接法
浏览次数:190发布日期:2022-03-09

ELISA实验方法之直接法仅需要抗原和酶标一抗,操作简便,可避免交叉反应,然而该方法要求酶标一抗有较高的特异性要求,同时也并非所有的一抗适合标记处理。直接法在实际运用中并不多见,它并不能对样本中抗体进行定量分析,因为样本中抗体是非酶标抗体,无法进行后续显色实验五大检测方法中的直接法。


首先,将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。

操作步骤如下:

⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上,ELISA实验方法之直接法形成固相抗人IgM。洗涤。


⑵加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。


⑶加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。


⑷加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。


⑸加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,ELISA实验方法之直接法是为阳性反应。

实验16.jpg


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