澳门威尼斯人注册网站-70570威尼斯城官网

您好,欢迎进入澳门威尼斯人注册网站-70570威尼斯城官网网站!
一键分享网站到:
您现在的位置:澳门威尼斯人注册网站 >> 技术文章 >> 免疫组化中抗体选择要求
免疫组化中抗体选择要求
浏览次数:236发布日期:2021-11-04

免疫组化中抗体选择的要求有哪些呢?

一抗选择要点 

1、选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对较低;而多克隆抗体特异性稍弱,抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等有所避免)。  

2、种属来源。一般家兔来源的抗体多是多克隆;而小鼠来源的抗体多是单克隆,但也有另外。这条主要要与后面的二抗来源相匹配。 

ELISA澳门威尼斯人注册网站

3、实验目的是检测什么种属的抗原,即species reactivity。这一点很重要,一般说明书上都有注明,如小鼠Ms、大鼠Rat、人Hum等等。 

4、能否做免疫组化。一般一抗说明书都会注明做WB、IHC、ICC、IF等,建议最好选择注明的抗体,因为一般都是经过文章证明。 

5、检测标本类型。用于检测石蜡切片还是冰冻切片,一般能做石蜡切片的抗体,可能都可以用来检测冰冻切片,但能做冰冻切片的抗体,不一定能检测石蜡切片中的抗原。 

6、生产厂家。国外著名抗体生产商原装抗体质量一般没问题,但有点贵;而国内分装厂家用的一抗工作液,价格便宜,但有时结果的稳定性和重复性稍差,尤其不同批次重复性较差。 

7、价格与质量的矛盾。一抗原装质量可能会好点,因为许多一抗避免反复冻融,且在稀释液中稳定性较差(若时间长),但价格较贵。


二抗选择要点: 

1、种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。 

2、标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗,以与后面的SP结合反应;而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗,如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。 

3、选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就选择IgM;反之,一抗是IgG,则二抗选择IgG。

    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
021-54845833
手机
13524933993

澳门威尼斯人注册网站|70570威尼斯城官网

XML 地图 | Sitemap 地图