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抗体和重组蛋白的使用及该如何保存的方法
浏览次数:239发布日期:2021-08-05

关于抗体和重组蛋白的使用方法和该如何保存的方法的先容。


不管是储存还是运输,均应避免冻融 。冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象变化,从而降低抗体的结合 能力 ,并加速抗体和重组蛋白的降解 。


正确地保存抗体和重组蛋白,直接影响到抗体和重组蛋白的活性使用 效果 ,如果保存得当,大多数抗体和重组蛋白的活性都能保持多年


1.在接收 到抗体 和重组蛋白后操作 。

接收 到抗体 和重组蛋白后(大部分 抗体 和重组蛋白都是 溶于 液体 ),一定要在4℃12000 rpm,离心 3分钟 ,然后 打开 盖子 进行 分装 、溶解 和保存 (若抗体 和重组蛋白体积 小于 50 ? l,请将离心 时间 延长 到5分钟 ,以确保 所有 的抗体 和重组蛋白都被离心 ,干粉 状态 同样 适用 )。 抗性 和重组蛋白采用 专门 的贮存 管,只需经12000 rpm离心 3分钟 ,就能将附着 在管壁 或盖子 上的抗体 和重组蛋白全部 离心 (甚至 10000 rpm离心 也会不完全 离心 ,导致 抗体 和重组蛋白数量 不足 )。 请仔细阅读 说明 ,按照 建议 的保存 条件 正确 保存 和使用 抗体 和重组蛋白。


2.抗体 及重组蛋白长期 保存 。

对大多数 抗体 和重组蛋白,较适宜 的保存 方法 为:抗体 分装 后保存 在-20 ℃,重组蛋白分装 后保存 在-80 ℃。

(1)分装 可-可大大减少重复 冻融 对抗体 和重组蛋白活性 的损害 ,同时 也降低 了从同一 管内 多次 汲取 抗体 和重组蛋白引起 的污染 的可能性 。

(2)分装 量最好 在一次 试验 结束 后再进行 ,少于 10 次? l每份 。 由于 重组蛋白的体积 越小,抗体 和重组蛋白的浓度 就越容易 受到 蒸发 和管壁 吸附 的影响 。

(3)复融 后的分装 抗体 和重组蛋白如一次 不用 ,应将剩余 母液 保存 在4℃,避免 再次 冻结 。

(4)抗体 及重组蛋白工作液 在配制 当天 要用完,4℃保存 的时间 不要 超过 1天。

(5)绝-避免 在自动 除霜 冰箱 中保存 抗体 和重组蛋白,在冰箱 的内层 保存 抗体 和重组蛋白,避免 温度 变化 引起 反复 冻融 。

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3.抗体 和重组蛋白的短期 保存 。

大多数 抗体 和重组蛋白在4℃4℃短时间 保存 1~2周,不影响 抗体 和重组蛋白的活性 。 若能尽快 使用 抗体 和重组蛋白(1~2周),建议 在4℃保存 ,以避免 反复 冻融 对抗体 和重组蛋白的活性 造成 损害 。 重点 是按照 说明书 推荐 的方法 ,正确 保存 抗体 和重组蛋白。


4. 抗体 和重组蛋白运输 条件 。

通常 运输 过程 需要 1~2个星期 ,因此需要低温 4℃条件 下。4℃ 运输主要的目的是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体和重组蛋白是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以运输过程中一般避免干冰运输。



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