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如何提高ELISA的精确重复性
浏览次数:91发布日期:2022-04-26

免疫检测法的精确性表现为单次实验孔间(批内)的重复性和多次实验之间(批间)的重复性,CV值高则表明精确度低。


通常由以下两个原因造成:移液技术和洗涤技术。


移液技术

1. 移液时,枪头应对准孔中央,避免接触孔壁及底部。

2. 移液后轻轻晃动混匀试剂。

3. 如果您的样品具有黏性,请预先润洗枪头以消除表面张力的影响,吸液时等待片刻使体积平衡后再取出。

4. 移液不充分或移液体积不均,说明移液器需要校正,必要时请检查移液器并重新校正。

5. 加样时,不同的试剂标准品和样本间都要确保更换枪头,避免交叉污染。

6. 确保使用合适的枪头,不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。


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洗涤技术

1. 如果使用自动洗板机或多通道移液器,请确保进出口能正常运作。

2. 最后一次洗涤后,翻转酶标板倒出多余的洗涤液,并在吸水纸上拍干液体,洗板太快或太慢都会降低精确度,不能让孔内液体自然风干,需马上进行下一步操作。

3. 按照说明书,添加足量的洗涤液至孔内,并保证洗涤完全。

4. 由于洗涤液不是通用的,当澳门威尼斯人注册网站内的洗涤液用完时,请不要使用其他澳门威尼斯人注册网站中的洗涤液,如有需要,可联系技术支撑寻求帮助。

5. 不要减少或增加洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。

6. 按照说明书上推荐的洗涤次数清洗,随意改变洗涤的次数会影响实验的精确性。


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